一、方案摘要：CCK-8全稱Cell Counting Kit-8試劑，可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。

二、方案詳情：CCK-8全稱Cell Counting Kit-8試劑，可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。為了減少CCK-8實驗復孔之間的差異，鋪板時要注意鋪均勻。

實驗原理

CCK8全稱Cell Counting Kit-8試劑，可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為：該試劑中含有水溶性的四唑鹽WST-8[化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽]，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物(Formazan dye)。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。

                   CKK-8檢測原理

三、操作步驟

1、先在蓋子上標記好信息

2、孔板最外圈加PBS

3、先用細胞計數(shù)器計數(shù)細胞懸液中的細胞數(shù)量，最好不要超過10^8/ML，然后將PIPETTY移液槍調到混勻模式，吹勻細胞懸液（如果用普通移液槍的話，細胞一定要吹打均勻，呈單細胞?。?/p>

4、將移液槍調到100μL的分液模式開始鋪細胞，為了避免細胞分布不均勻，先用移液槍將吹打均勻的細胞吸起來，讓后將槍頭緊貼著孔的一側壁(注意槍頭的尖不要接觸孔底)，然后將槍頭中的細胞緩緩的打下去，種好之后千萬不要搖晃板子。

5、第一個細胞鋪完啦，現(xiàn)在重復以上步驟開始鋪第二個細胞，(這里有個小TIPS，如果用普通移液槍需要鋪10個孔混勻一次細胞液，避免細胞沉降帶來誤差，但是PIPETTY移液槍非常便捷，一步到位，吹打一次就OK啦）

補充：從6孔板到96空板要細胞分散均勻，先用培養(yǎng)基把細胞稀釋好，再把培養(yǎng)板放在適當?shù)奈恢?，加入細胞時和加入細胞后不移動培養(yǎng)板;如果空中有的地方沒有培養(yǎng)基可吹打，但不要移動培養(yǎng)板，加入細胞后靜置20-30分鐘再移入培養(yǎng)箱。這樣細胞一般都能長的很均勻。當然，前提是細胞消化的很好。